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HIV DNA测定改善MSM人群中HIV感染的筛查:具有策略意义

2019年09月30日

摘要


快速检测(RT)是人类免疫缺陷病毒(HIV)防控中主要筛选方法。但是,这种方法可能会导致检测不准确,这主要是由于超过4周的窗口阶段。在本研究中,我们进行了HIV DNA筛查方法,以显示其在男男性接触者(MSM)中的应用前景。 从2017年7月到2018年4月,我们从北京招募了1301名男男性接触者,这些人从未被诊断为HIV阳性。我们开展了了HIV DNA检测和RT。 通过DNA检测和RT分别检测到141和135个HIV阳性结果。 通过复检和确认试验(蛋白质印迹),我们证实了DNA检测比RT检测到更多的真阳性,并且从RT结果中校正了4个假阳性。也就是说HIV DNA测量校正了14个不准确的RT结果。 因此,HIV-1 DNA测量应该被充分考虑作为未来MSM中HIV感染的的筛选方法。

 



背景


2014年,联合国艾滋病规划署制定了“90-90-90”目标——在2020年前,所有艾滋病病毒感染者中有90%知道自己的艾滋病病毒感染状况,90%的艾滋病病毒感染者将接受抗逆转录病毒治疗,90%接受抗逆转录病毒治疗的人治疗将实现病毒抑制[1]。据估计,2015年在中国只有约68%的艾滋病病毒感染者知道自己的感染情况[2]。因此,应该做出更多努力来缩小当前结果与90%目标之间的差距。历史上,中国艾滋病的流行与女性性工作者(FSW)和注射吸毒者(IDU)有关[3-4]。虽然近年来艾滋病病毒感染的增长率有所下降,但新感染的男男性接触者(MSN)的发病率却在迅速上升[5-8]根据之前的研究,中国MSN人群中艾滋病的流行率约为10%[7,9-11],与其他高危人群相比,这是非常严重的[6]。

中国采取多种方法对抗艾滋病,包括扩大艾滋病毒检测的范围[12]。根据目前的国家HIV检测指南,RT是主要的筛查方法。然而,由于窗口阶段超过四周,这种方法很容易导致假阴性结果[13]。根据先前的研究,假阴性检测将导致向前传播增加[14-17]。因此,在检测到病毒之前缩短窗口期可以通过识别更多的HIV阳性个体来防止向前传播。与RT相比,核酸检测具有约7-11天的较短窗口期[13]。该方法已在中国血液筛查中得到广泛应用,并被证明是非常有效的[18-20]。在本研究中,我们采用HIV DNA检测作为筛选方法,以显示其在MSM中的应用前景。

 

 

材料与方法


道德声明

本研究经北京市疾病预防控制中心批准。 所有参与者均提供知情同意,并批准样本用于本研究。 为参与者分配了本研究独有的识别号,结果只能由他们自己查询。


样品采集

2017年7月至2018年4月,参与者从北京朝阳区,海淀区和丰台区的医院或MSN组织招募。 参与者的入选标准为没有年龄限制的MSM,并且未被诊断为HIV阳性。 在该研究中,样品类型是干血斑(DBS)。 在DBS采集卡(Kinghawk Pharmaceuticals Co.,Ltd.,Beijing,China)上将全血点在预印的圆圈上,并在室温下风干。 制作DBS并由护士邮寄给国家HIV参比实验室,并尽快进行DNA测量。将DBS卡储存在-20℃。 每张DBS卡都分配了一个唯一的号码,只能由参与者查询。


快速检测和DNA检测

在DBS制备期间通过RT测试参与者的HIV状态。我们使用核酸提取试剂盒(SUPBIO,中国)提取前病毒HIV DNA。 我们利用人免疫缺陷病毒I型(HIV-1)DNA检测试剂盒(PCR-Fluorescent Probing)(广州海力特生物科技有限公司,中国)测定了HIV DNA,测定仪器为荧光定量PCR仪器,Bio-Rad CFX96(Bio-Rad Laboratories,Inc.)。

 

致谢

该项目得到了国家科技重大专项(No. 2018ZX10732101-001-010)和中国广东省科技计划项目(No.2016B020238002)的支持。 作者声明没有利益冲突。




注: 此文章仅为部分翻译原英文文献,详细英文版请点击下载源文件查看 >


 

文献

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